На безгормональной среде растут опухолевые и «привыкшие» ткани. Автономность по отношению к обоим гормонам или к одному из них связана со способностью этих клеток синтезировать гормоны.
В качестве источников ауксинов в питательных средах используют 2,4-дихлорфеноксиуксусную кислоту (2,4-Д), индо-лил-3-уксусную кислоту (ИУК), а-нафтилуксусную кислоту (НУК). Для получения рыхлого хорошо растущего каллуса чаще применяют 2,4-Д, так как ИУК почти в 30 раз менее активна, чем 2,4-Д.
В качестве источников цитокининов в искусственных питательных средах используют кинетин, б-бензиламинопурин (б-БАП), зеатин. б-БАП и зеатин проявляют более высокую активность в поддержании роста изолированных тканей и индукции органогенеза по сравнению с кинетином. В состав некоторых сред входит аденин.
В настоящее время известно большое число различных по составу питательных сред, но наиболее часто применяемая при выращивании изолированных растительных тканей в условиях in vitro среда Т. Мурасига и Ф. Скуга, впервые составленная в 1962 г. Эта среда содержит хорошо сбалансированный состав питательных веществ и отличается от других, как правило, соотношением аммонийного и нитратного азота (табл. 1.2).
Таблица 1.2. Состав питательных сред для культивирования изолированных тканей растений
Компоненты питательной среды |
Концентрация, мг/л |
|||
Мурасн-га - Скуга |
Гамборга |
Шенка- Хиль-дебрандта |
Грее-хофф - Доу |
|
NH4NO3 |
1650 |
2500 |
2500 |
- |
NH4H2PO4 |
- |
- |
300 |
- |
1 KN03 |
1900 |
- |
- |
1000 |
СаС12 • 2Н20 |
440 |
150 |
200 |
150 |
MgS04 • 7Н20 |
370 |
250 |
400 |
250 |
(NH4)2S04 |
- |
130 |
200 |
|
КН2РО4 |
170 |
- |
- |
|
Ыа2ЭДТА |
37,3 |
37,3 |
20,0 |
37,3 |
FeS04 • 7НгО |
27,95 |
27,-85 |
15,0 |
27,8 |
NaH2P04 *Н20 |
- |
150 |
- |
90 |
Продолжение табл. 1.2