Сельскохозяйственная биотехнология-стр.136

Интересные данные были получены на матрицах, состоящих из повторяющегося тетрануклеотида. В этом случае должны синтезироваться полипептиды с повторяющейся последовательностью из четырех аминокислот. На матрице поли (УАУЦ) шел синтез полипептида с повторяющейся последовательностью тирозин-лейцин-серин-изолейцин независимо от рамки считывания (см. рис. 2.11, б). Достаточно знать кодон для одной из аминокислот, чтобы определить остальные. Однако совершенно иные результаты были получены при использовании поли (ГУАА) и поли (АУАГ) (см. рис. 2.11, б). Продуктами реакции были только ди- и трипептиды. Это связано с тем, что три из 64 кодонов не кодируют аминокислот, а выполняют роль терминаторов белкового синтеза. В первом случае синтез останавливался на кодоне УАА, во втором - на кодоне УАГ. Именно по этой же причине на матрицах поли (ГУА) и поли (ГАУ) синтезировалось только два гомопептида. Одна из рамок считывания соответствует стоп-кодону (УГА и УАГ, соответственно).

Метод связывания рибосом. Ниренберг и Ледер разработали в 1964 г. другой метод расшифровки кодонов. Они установили, что тринуклеотиды стимулируют связывание с рибосомами тРНК, которая, в свою очередь, связана с аминокислотой, соответствующей данному тринуклеотиду. Это имитирует процесс взаимодействия кодона с антикодоном, который происходит на рибосомах между тРНК и мРНК. Таким образом, связывая рибосомы на нитроцеллюлозных фильтрах, можно выделить тройные комплексы: тринуклеотид - аминоацил-тРНК (в комплексе с аминокислотой) - рибосома. Не связанные с рибосомами молекулы тРНК проходят через фильтр и на фильтре можно обнаружить ту аминокислоту, которая связана с'тринуклеотидом, добавленным к смеси.

Другие материалы